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不同ELISA試劑盒的洗滌要求有何不同?

更新時間:2025-06-24    點擊次數(shù):518

  不同ELISA試劑盒的洗滌要求有何不同?

 

  不同ELISA試劑盒的洗滌要求存在顯著差異,主要體現(xiàn)在以下關鍵參數(shù)上:

  一、洗滌次數(shù)差異

  夾心法ELISA‌

  通常需5-6次洗滌(如試劑盒要求孵育后洗4-5次)以去除未結合物質,降低背景干擾。

  競爭法/間接法‌

  洗滌3-4次即可,過度洗滌易導致抗原-抗體復合物解離(如間接法最后一步僅需DDW洗滌)。

  二、洗滌液類型與體積

  試劑盒類型 洗滌液成分 單孔體積要求

  常規(guī)夾心法 含0.05% Tween-20的PBST 300-350μL

  高靈敏度試劑盒 含0.1% BSA的PBST 400-500μL

  流水沖洗式試劑盒 純蒸餾水或自來水 持續(xù)沖洗2分鐘

 

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  三、特殊操作要求

  浸泡時間‌

  多數(shù)試劑盒要求靜置1-2分鐘(如本生試劑盒)

  部分高背景樣本需延長至3分鐘

  抽吸方式‌

  自動化洗板機需設置吸液高度距孔底0.5-1mm

  手工洗板要求拍干力度均勻,避免垂直猛拍

  四、關鍵注意事項

  封閉后洗滌‌

  包被后需用PBST洗3-5次,而封閉后通常僅需快速過洗1次。

  顯色前洗滌‌

  夾心法最后一步洗滌需增至5次(如某試劑盒要求TMB顯色前洗5次)。

  廠商差異提示‌:

  洗滌液嚴禁跨品牌混用(如某品牌洗滌液含去垢劑);

  部分試劑盒要求顯色前用蒸餾水終洗。

  注:以上資料僅供參考,如需完整說明,建議聯(lián)系供應商獲取隨貨文件。

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